细胞扩增培养方案：

第0天：

a. 按以下方法准备新鲜完整的T细胞扩增培养基：

向 T细胞扩增培养基中加入细胞因子——人重组IL-2充分混合。

b. 在新鲜完整的T细胞扩增培养基（步骤a中配制）中接种活化的人T细胞，接种量为1x10^6细胞/mL。

第1天：激活T细胞时，向细胞悬液中加入25 µL/mL的人细胞激活剂。将细胞在37℃和5% CO₂下孵育3天。

第3天：充分混合细胞悬浮液，进行活细胞计数。通过添加新鲜的完整T细胞扩增培养基将细胞悬浮液体积扩大8倍（调整活细胞密度至约1.0-2.5×10⁵细胞/mL）。在37°C和5% CO₂条件下培养2天。

第5天：充分混合细胞悬液，进行活细胞计数。至少将体积扩大4倍（将活细胞密度调整至约1.0至3.0×10⁵细胞/mL），向其中加入新鲜的完全 T细胞扩增培养基。在37°C和5% CO₂条件下培养2天。

第7天：充分混合细胞悬液，进行活细胞计数。至少将体积扩大4倍（将活细胞密度调整至约1.0至6.0×10⁵细胞/mL），向其中加入新鲜的完全T细胞扩增培养基。在37°C和5%CO₂条件下培养3天。

第10天：如果达到了所需的细胞数量，即可收获细胞。

可选步骤：通过添加新鲜的完全培养基T细胞扩增培养基进行活细胞计数，并保持细胞密度在0.5-1.0×10⁶细胞/mL之间。在37°C和5% CO₂的条件下培养2天后，即可收获细胞。

对于人 T 细胞的长期扩增（> 12 天）：

a.在新鲜的完全 T 细胞扩增培养基中以 1×10⁶个细胞/mL的浓度收获并重悬扩增的 T 细胞。

b.通过添加 25μL/mL的细胞激活剂进行再刺激。

c.在 37°C 和 5% CO₂孵育。每 2 - 3 天通过添加新鲜的完全 T 细胞扩增来调整细胞密度。

注：确保每 2 - 3 天添加一次新鲜的完全培养基；培养基添加之间的间隔不要超过 3 天。