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    永生化的人T淋巴细胞Immortalized Human T Cells

    货号:QuiCell-Y536

    规格:T25

    形态:悬浮生长

    培养基:T淋巴细胞专用完全培养体系

    货期:一周左右

    价格:38000

    产品概述


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    细胞扩增培养方案:

    0天:

    a. 按以下方法准备新鲜完整的T细胞扩增培养基:

    T细胞扩增培养基中加入细胞因子——人重组IL-2充分混合。

    b. 在新鲜完整的T细胞扩增培养基(步骤a中配制)中接种活化的人T细胞,接种量为1x10^6细胞/mL

     

    1天:激活T细胞时,向细胞悬液中加入25 µL/mL的人细胞激活剂。将细胞在375% CO2下孵育3天。

    3天:充分混合细胞悬浮液,进行活细胞计数。通过添加新鲜的完整T细胞扩增培养基将细胞悬浮液体积扩大8倍(调整活细胞密度至约1.0-2.5×105细胞/mL)。在37°C5% CO2条件下培养2天。

    5天:充分混合细胞悬液,进行活细胞计数。至少将体积扩大4倍(将活细胞密度调整至约1.03.0×105细胞/mL),向其中加入新鲜的完全 T细胞扩增培养基。在37°C5% CO2条件下培养2天。

    7天:充分混合细胞悬液,进行活细胞计数。至少将体积扩大4倍(将活细胞密度调整至约1.06.0×105细胞/mL),向其中加入新鲜的完全T细胞扩增培养基。在37°C5%CO2条件下培养3天。

    10天:如果达到了所需的细胞数量,即可收获细胞。

    可选步骤:通过添加新鲜的完全培养基T细胞扩增培养基进行活细胞计数,并保持细胞密度在0.5-1.0×106细胞/mL之间。在37°C5% CO₂的条件下培养2天后,即可收获细胞。

     

    对于人 T 细胞的长期扩增(> 12 天):

    a.在新鲜的完全 T 细胞扩增培养基中以 1×106个细胞/mL的浓度收获并重悬扩增的 T 细胞。

    b.通过添加 25μL/mL的细胞激活剂进行再刺激

    c.37°C 5% CO2孵育。每 2 - 3 天通过添加新鲜的完全 T 细胞扩增来调整细胞密度。

    注:确保每 2 - 3 天添加一次新鲜的完全培养基培养基添加之间的间隔不要超过 3 天。

     


    参考文献
    朱莎莉

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    【 湖北、河南 】

    刘本佳

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    【 江苏、上海、安徽 】

    章臣雄

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    【 广东、云南 】

    閤春喜

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    【 四川、陕西、甘肃、西藏 】

    刘轶铭

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    【 重庆 】

    石文平

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    【 北京、黑龙江、吉林、辽宁 】

    任施博

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    【 江西、福建、新疆、海南 】

    李荣枫

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    【 天津、河北 】

    2. 纪丽

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    【 内蒙古、山西 】

    陈雨兰

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    【 湖南、山东、宁夏、青海 】

    尹国文

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    【浙江、广西、贵州】

    黄龄

    黄玲

    【 四川、陕西、甘肃、重庆、西藏、浙江 】

    李欢欢

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    【 江苏、安徽、河北、山西、天津、内蒙古 】

    吕奇晏

    吕奇晏

    【 广东 】

    卢丽丽

    卢丽丽

    【 北京、辽宁、吉林、黑龙江 】

    林梦君

    林梦君

    【 上海、宁夏、青海、福建】

    蔡玉洁

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    【 湖南、广西、贵州、云南、山东】

    徐婷

    徐婷

    【 湖北、河南、江西、新疆、海南】