免疫共沉淀
浏览量: 发布时间:2023-03-14
免疫共沉淀
原理
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是在免疫沉淀的基础上发展起来的研究蛋白质相互作用的分析技术,是免疫沉淀技术的补充和延伸。很多刚入门的小白可能对免疫共沉淀Co-IP还不是很了解,所以今天小编带大家一起来了解免疫共沉淀的技术原理。
免疫共沉淀基于抗体与抗原特异结合的原理,利用专一性抗体特异性识别混合体系中两个相互作用的蛋白质中的其中一个,然后将两者一起沉淀出来,用来鉴定两种已知蛋白间的相互作用或者已知蛋白与某种未知蛋白间的相互作用。该技术使用非变性剂裂解细胞,保留细胞中蛋白质A-蛋白质B间的相互作用,再将其与蛋白A或B的专一性抗体混合,此时抗体会与蛋白A或B结合使其沉淀,同时蛋白B或A也被共沉淀下来,这种一次免疫结合沉淀两种相互作用的蛋白的技术就叫免疫共沉淀。
步骤
样品要求
1.新鲜或正确保存的样品:
A)细胞>1x107;组织>100mg;细菌湿重>1mg;植物>100mg;血清>50ul。
B)样品蛋白浓度> 1mg / ml;蛋白量>200ug/样品。
2.目的蛋白一抗,空白或者阴性同种属 IgG。
3.阳性对照样品。
4.相关文献。